Výhody a nevýhody PCR (a) na diagnostiku tuberkulózy

Špecifická infekcia tuberkulózy bola prítomná v ľudských tkanivách a štruktúrach mnoho rokov a za určitých okolností sa rýchlo šíri po celom tele za 2-3 mesiace. Niekedy je veľmi ťažké vybrať najlepší priebeh liečby z dôvodu neskorej diagnózy a adaptácie patogénu na mnohé lieky.

Najnovšia PCR diagnostika tuberkulózy pomáha odhaliť nielen vyvinuté ochorenie, ale aj samotný patogén, keď sa prvé príznaky ochorenia ešte neobjavili.

Čo je to PCR?

Nedávno sa objavila diagnóza tuberkulózy pomocou PCR. V roku 1983, mikrobiológ z Ameriky, Cary Mullis, vymyslel postup, pomocou ktorého by sa mikroorganizmy mohli rekonštruovať z biologického materiálu v krátkom segmente. Táto práca získala Nobelovu cenu.

PCR na tuberkulózu je proces polymérneho reťazca, v ktorom diagnostika a detekcia vírusových patogénov genetickým inžinierstvom. Táto technika sa používa v imunologických, mikrobiologických, virologických a biochemických laboratóriách.

Univerzálna metóda pomáha lekárom diagnostikovať a identifikovať infekčný proces aj po prvých hodinách infekcie, dlho pred nástupom príznakov. Výskum je možný aj pri malom množstve biomateriálu.

Čo je potrebné na analýzu?

• Niekoľko segmentov DNA (priméry), s ktorými začína biologická syntéza;
• Nukleotidové zlúčeniny, základ molekuly DNA alebo RNA;
• Enzým polymerázy, ktorý urýchľuje PCR analýzu.

Aký je základ metódy?

Po prvé, segment DNA je extrahovaný z biomateriálu z infikovanej osoby s použitím metód génovo-molekulárnej biosyntézy, ďalej je určený typ mikroorganizmov, ku ktorým patrí biofragment.

Táto komplexná reakcia trvá menej času ako niektoré biometódy. PCR určuje patogén v priebehu niekoľkých hodín, zatiaľ čo nie je potrebné ho izolovať od biologickej tekutiny (spúta, cerebrospinál alebo krvné médium), nie je nutné ho dlhší čas pestovať na živnom médiu. Stačí, že študovaný materiál obsahuje DNA vlákno infekčného patogénu.

Pri uskutočňovaní PCR krvného testu na tuberkulózu in vitro sa umelo vytvára syntéza ribonukleových kyselín mycobacterium tuberculosis.

Fázy diagnostiky

Molekulárna reakcia pomocou PCR je jednoduchý postup, ktorý trvá málo času. Vyberie sa požadovaný biomateriál: na stanovenie tbc sa použije krv, spútum, premývacia kvapalina priedušiek.

1. Po prvé, primárna forma DNA je zničená, 2 reťazce sú oddelené pri vysokej teplote (maximálne 98 ° C počas maximálne 2 minút);
2. Potom sa vykoná žíhanie, primárna teplota sa redukuje niekoľkými deleniami, reťazec DNA je spojený s primérom;
3. Ďalšia fáza sa nazýva elongácia s biosyntézou potrebných molekulárnych štruktúr.

Na získanie požadovaného počtu kópií DNA musí prejsť 25 až 30 takýchto cyklov a výsledný počet mykobaktérií je ľahko rozpoznateľný.

Je potrebné urobiť PCR na tuberkulózu?

Priamo všetkým pacientom s podozrením na TVC sa nerobí diagnostika reťazca, pretože postup vyžaduje použitie drahého zariadenia. Nie všetky zdravotnícke zariadenia umožňujú, aby boli zakúpené, najmä preto, že obvyklé metódy diagnostikovania mycobacterium tuberculosis sú tiež informatívne.

• Starostlivý priebeh anamnézy, vypočúvanie pacienta;
• Externá skúška;
• Tuberkulínový test Mantoux;
• Rádiografické alebo fluorografické vyšetrenie;
• V prípade potreby počítačová diagnostika;
• Mikroskopické alebo bakteriologické vyšetrenie masky spútom.

PCR na tuberkulózu sa vykonáva len vtedy, keď nie je možné vykonať inú inštrumentálnu analýzu alebo za okolností, ktoré je ťažké diagnostikovať.

Napriek tomu, že bol vynájdený veľký počet diagnostických metód, počet pacientov s tuberkulózou naďalej rastie. Okrem toho incidencia nadobudla niektoré znaky: často sa pozorovala závažná forma ochorenia, počet úmrtí sa zvyšuje, patogén sa stáva rezistentným voči existujúcim chemoterapeutickým liekom.

Mnohí ľudia nechcú každoročne podstúpiť rutinnú inšpekciu, odmietnuť očkovanie, čo vedie k zvýšeniu incidencie. Takéto okolnosti si vyžadujú účinné a informatívne výskumné metódy dostupné pre dospelých a deti diagnostikované tbc. PCR má výhody oproti iným diagnostickým metódam.

Aká je hodnota metódy?

Tento najnovší výskum sa osvedčil dobre. Ak je z mnohých dôvodov ťažké stanoviť diagnózu, alebo v niektorých kontroverzných prípadoch PCR detekuje bacil tuberkulózy ľahšie v biologickom materiále ako iné metódy.

• Táto rýchla štúdia, malý segment molekuly umožňuje presné stanovenie diagnózy v krátkom čase v priebehu 5 hodín, čo sa používa v naliehavých prípadoch, napríklad pred urgentným chirurgickým zákrokom;
• Krvný test na tuberkulózu je možný, ak sú iné metódy nedostupné alebo kontraindikované - niekedy na detekciu patogénu tbc, je potrebné odobrať mnoho Rg-záberov, pričom dávka žiarenia je príliš veľká;
• Použitím polymerázovej reakcie sa môžu skúmať akékoľvek biologické tekutiny na prítomnosť mykobaktérií. Napríklad môžete vykonať štúdiu mozgovomiechového moku s tuberkulóznou meningitídou alebo močom s urogenitálnou tuberkulózou;
• Metóda je bezpečná, diagnostika tuberkulózy u detí pomocou PCR nespôsobuje ťažkosti;
• Spôsob polymerizačnej reakcie odhaľuje bacil tuberkulózy v akejkoľvek forme a štádiu ochorenia;
• Prítomnosť len niekoľkých baktérií v biomateriáli vám umožňuje vidieť prítomnosť mikroorganizmov, pretože ide o citlivú reakciu;
• PCR ľahko diagnostikuje recidívu ochorenia.

Napriek obrovskému množstvu výhod, všetci pacienti s podozrením na štúdiu tbc sa neuskutočnili, pretože existujú aj nevýhody, ktoré sa tiež berú do úvahy.

video

Video - včasná diagnostika

Aké sú nevýhody?

Táto metóda diagnózy je skôr výnimočná ako prirodzená, preto existujú dôvody. V prvom rade sa berú do úvahy vysoké náklady na túto metódu. Zariadenie je drahé, verejné kliniky nemajú možnosť ho kúpiť kvôli vysokej cene, ale väčšina platených laboratórií má zariadenie, ktoré je analyzované.

• Metóda detekuje mŕtve baktérie, ktoré uhynuli po liečbe, zatiaľ čo PCR vykazuje pozitívny výsledok. Bezprostredne po chemoterapii nemá zmysel vykonávať štúdiu, pretože výsledok bude nespoľahlivý;
• Mutácie Mycobacterium tuberculosis sú citlivé, čo vedie k neefektívnosti metódy a reťazec DNA nemôže byť syntetizovaný konzistentne.

Prostredie pre štúdiu by sa malo starostlivo vyberať, krv alebo moč sa môžu zbierať iba v prípade podozrenia z infekcie. Pri vyšetrení na kostnú tuberkulózu sa nemá vyšetriť spúta. V tejto situácii bude diagnóza nesprávna.

Krv a moč pacienta s tuberkulózou, ktorý sa má študovať na PCR, sa zriedka užíva, identifikácia ochorenia týmto spôsobom je sporná. V týchto biologických médiách je patogén určený len pri sepsi alebo v prípade diseminovanej tuberkulózy. Miestne formy sú najčastejšie, ich krv a moč môžu zostať nezmenené. Najčastejšie sa hlien berie na vyšetrenie.

Kto ukazuje analýzu?

Väčšina pacientov sa posiela na diagnostiku PCR v kontroverzných a ťažkých prípadoch tuberkulózy. Kedy lekári vydávajú odporúčania na výskum?

1. Ak existuje kontakt s osobou, ktorá bola spoľahlivo diagnostikovaná s tuberkulózou, je ťažké diagnostikovať ju pomocou konvenčných metód;
2. Za týchto okolností, ak pacient poskytne kliniku nie je možné pre rádiografiu alebo iný výskum. V takejto situácii je ľahšie kontrolovať metódu polyméru. Analýza spúta je jednoducho dodaná do laboratória v špeciálnom kontajneri a výsledok je známy po niekoľkých hodinách;
3. Pred operáciou je naliehavo potrebné určiť, či je pacient chorý na tuberkulózu, v takom prípade je indikovaná PCR;
4. Kvôli bezpečnosti metódy je možné vykonať prieskum tehotnej ženy alebo dieťaťa bez vytvorenia dodatočného zaťaženia röntgenovým žiarením;
5. Pochybné výsledky testu Mantoux.

Každý, kto chce, môže byť vyšetrený za poplatok, ak tuberkulóza nebola potvrdená pomocou bakteriológie a fluoroskopie. Toto sa stane, ak je lézia v pľúcnom tkanive v obraze Rg neviditeľná v priamej projekcii a pacient nie je schopný správne odobrať spúta, ale príznaky ľudskej tuberkulózy sú narušené.

Moderná PCR reakcia na diagnózu je kľúčom k úspešnej liečbe, v dôsledku čoho sa prevalencia ochorenia znižuje. Tradičné metódy identifikácie ochorení nie vždy vyvolávajú požadovaný účinok.

PCR analýza sa doteraz stala jednou zo spoľahlivých a bezpečných metód diagnózy v skorých štádiách ochorenia.

PCR analýza tuberkulózy

PCR analýza tuberkulózy je najobľúbenejšia medzi lekárskymi výskummi v oblasti tohto ochorenia.

Ale ako varovať seba a svojich blízkych pred touto strašnou chorobou? Ako zložiť potrebné testy na PCR?

Príznaky tuberkulózy a jej prevencia

Odborníci hovoria, že asi 30% z celkovej populácie trpí tuberkulózou.

Najvyššie percento choroby sa vyvinulo v nerozvinutých krajinách. Toto sa najčastejšie vyskytuje ako výsledok zníženej imunity u ľudí.

Choroba je jednou z najstarších. Toto ochorenie sa nachádza v výstelke mozgu, v zažívacom trakte, na kĺboch ​​a chrbtici, v močovom systéme av malých oblastiach na ľudskej koži.

Odborníci najľahšie určujú postihnutú kožu. Na mieste sú malé plomby, ktoré časom zväčšujú veľkosť, vybuchli belavou tekutinou.

Kauzálny agens tuberkulózy môže byť najčastejšie zachytený, keď hovorí s chorou osobou, keď kašeľ alebo kýchanie. Zvyčajne choroba prebieha bez príznakov alebo má otvorenú formu, ale PCR diagnostika tuberkulózy umožňuje odhaliť ju v počiatočných štádiách av núdzových prípadoch.

Príznaky ochorenia: dlhodobý mokrý kašeľ, horúčka, zimnica, nadmerné potenie v noci, prudká strata hmotnosti, pocit únavy a slabosti.

Otvorená forma ochorenia je najnebezpečnejšia. Človek trpiaci tuberkulózou je schopný infikovať zdravých ľudí.

Najdôležitejším príznakom pľúcneho ochorenia je hemoptýza. Vyskytuje sa v akejkoľvek forme ochorenia.

V niektorých situáciách to môže viesť k krvácaniu z pľúc osoby. Je to veľmi nebezpečné a vyžaduje neodkladný lekársky zásah.

Na prevenciu a rozpoznávanie tuberkulózy odborníci predpisujú: vzorku - tuberkulínový test, vyšetrenie biologického materiálu, fluorografiu, röntgenové vyšetrenie a krvný test, spútum alebo sliny.

Diagnóza ochorenia

Lepšia diagnostika ochorenia - to je správne a počas liečby. Vo väčšine prípadov zvyčajné metódy detekcie patogénov nemajú vždy účinok a sú už zastarané.

Najdôležitejším spôsobom identifikácie a diagnostiky pľúcneho ochorenia je lekárske vyšetrenie. Zvyčajne sa používa PCR diagnostika. Tento prieskum bol nedávno objavený v roku 1983 americkým biochemikom Mullisom.

Test u pacienta s pľúcnou tuberkulózou sa vykonáva výlučne v špeciálnych prípadoch, keď je ťažké stanoviť diagnózu alebo nie je možné zistiť ochorenie inštrumentálnym spôsobom.

Polymerázová reťazová reakcia je spoľahlivá metóda PCR. Táto analýza umožňuje určiť pôvodcu toho, koľko je v krvi, moči a miechových tekutinách. Takéto lekárske vyšetrenie je najbezpečnejšie.

PCR analýza dáva 100% výsledok.

Má vysokú citlivosť, ktorá pomáha rozpoznať ochorenie po prvý raz po infekcii predtým, ako sa objavia príznaky ochorenia. Táto metóda analýzy poskytuje výsledok v priebehu niekoľkých hodín po dodaní biologického materiálu. Výsev tejto analýzy sa vykonáva trikrát, ale aspirácia chorého žalúdka sa vykonáva len v nemocnici.

Na stanovenie výsledkov boli vyvinuté tri kritériá: vysoká presnosť, citlivosť až 90%, špecifickosť.

V niektorých prípadoch sa používa test na PCR:

1. diagnostikovať pľúcnu tuberkulózu;
2. určiť zdroj choroby;
3. definícia extrapulmonálnej lokalizácie;
4. diagnózy opakovania.

Vyhodnotiť výsledok a predpísať správne lekárske ošetrenie, môže len špecialista. Je veľmi dôležité priradiť správnu schému lekárskeho ošetrenia na zistenie tuberkulózy, je potrebné vykonať test citlivosti patogénu na zariadenia proti tuberkulóze.

Rôzne lekárske testy tuberkulózy

Potrebnú analýzu môžete vykonať dvoma spôsobmi: odoberať krv alebo sliny od osoby alebo si vziať spúta.

Krvné testy PCR môžu byť dvoch typov: ELISA a PCR. Takáto štúdia pomáha monitorovať účinnosť lekárskeho ošetrenia.

ELISA pomáha nájsť protilátky v ľudskom tele, ktoré odolávajú mikrobom tuberkulózy. Táto štúdia sa vykonáva raz denne. Hlavnou nevýhodou je nízka citlivosť, ktorá umožňuje stanoviť len ochorenie s nízkou úrovňou infekcie.

Najobľúbenejším a najúčinnejším výskumom je analýza mycobacterium tuberculosis. S ňou môžu lekári ľahko nájsť DNA baktérií v ľudskej krvi. Táto metóda sa tiež používa na stanovenie počtu baktérií, na kontrolu liečby pacienta, na zistenie skorého opakovaného výskytu.

PCR sliny sú jednou z najmodernejších výskumných metód. Takáto analýza pomôže identifikovať infekčné baktérie v slinách. Použitím PCR sa zvyšuje počet fragmentov DNA škodlivých mikróbov.

Metóda kultivácie je určená na vyšetrenie ľudského spúta na detekciu mikrobaktérií.

Príprava na PCR testovanie

Pozor, potrebujete správnu prípravu slín na PCR. Ak nie sú dodržané všetky predpisy, analýza môže byť falošne pozitívna.

Pred vykonaním testu je zakázané fajčiť, prijímať jedlo a lieky, ako aj konzumovať alkohol počas 12 hodín. Je zakázané čistiť si zuby, nemôžete používať leštiaci prostriedok, osviežovač úst a dentálnu niť.

Je zakázané používať rúž a vstúpiť do intímnych vzťahov. Povolené opláchnuť ústa hladkou prevarenou vodou;

Toto vyšetrenie pomôže identifikovať: herpes, chlamydia, tuberkulózu, patogény pneumónie, onkovírusy, barolleózu, mononukleózu, HIV, hepatitídu všetkých druhov, rubeolu.

Analýza mykobaktérií sa uskutočňuje hlavne v kontroverzných prípadoch, najmä ak je ťažké stanoviť diagnózu alebo sa pred začatím operácie zistil kontakt s pacientom s tuberkulózou, aby sa zistila choroba. Používa sa na vyšetrenie tehotnej ženy, pretože táto metóda je pre matku a plod najbezpečnejšia.

Niekedy sa analýza vykonáva na súkromnej klinike, pretože pacient nedodržal pravidlá testovania, ale zároveň sa obáva všetkých symptómov. Analýza môže byť vykonaná, keď špecialisti nie sú istí po vykonaní Mantoux testu alebo pacient je dieťa.

Výhody a nevýhody lekárskych vyšetrení na stanovenie tuberkulózy

PCR je najobľúbenejším a najúčinnejším spôsobom na určenie ochorenia.

Jeho najväčší rozdiel oproti iným štúdiám je rýchly a presný výsledok.

Výhoda tohto lekárskeho vyšetrenia spočíva v tom, že sa môže vykonávať v urologických, gynekologických, onkologických, infekčných, hematologických, pľúcnych, gastroenterologických a iných štúdiách.

Hlavnou výhodou takejto lekárskej štúdie je, že krvné testy, spúta a sliny sú pripravené v krátkom čase (odhalenie ochorenia trvá 5 hodín). Takéto lekárske vyšetrenie umožňuje vykonávať testy, keď sú určité metódy štúdia choroby zakázané alebo neprístupné. Skvelé na detekciu recidívy u ľudí.

Vďaka tejto analýze bolo možné vykonávať výskum pre akékoľvek biologické prostredie. Je povolené odoberať materiál od detí. PCR umožňuje identifikovať pôvodcu v akomkoľvek štádiu ochorenia. Vďaka svojej vysokej citlivosti sa mikróby nachádzajú aj v prípade, že je prítomných len niekoľko baktérií.

Metóda PCR rozširuje svoje možnosti. Používa sa aj na stanovenie otcovstva, na výrobu nových génov, mutácií, na kríženie prvkov DNA a podobne.

Nevýhodou tejto štúdie je nákladná metóda prieskumu.

Po lekárskom ošetrení môže krvný test preukázať prítomnosť živých alebo odumretých patogénov v malých množstvách, po lekárskom vyšetrení bude mať pozitívny výsledok.

Baktérie a mikróby môžu podstúpiť mutáciu, po ktorej PCR nebude schopná ich identifikovať a identifikovať, preto iba špecialista môže predpísať štúdiu požadovaného prostredia, inak bude takéto lekárske vyšetrenie neúčinné.

Po testovaní je negatívny výsledok, čo však nevylučuje možnosť infikovania osoby tuberkulózou. Takéto lekárske vyšetrenie sa vykonáva u pacientov so závažným ochorením pľúc, keď iné štúdie neposkytujú presné výsledky. PCR bude užitočná pre ľudí s pľúcnou a extrapulmonálnou tuberkulózou.

Bohužiaľ, zdravotnícke zariadenia na detekciu patogénov tuberkulózy sú veľmi drahé.

Verejné nemocnice a kliniky si to nemôžu dovoliť, ale platené kliniky uskutočňujú testy pacientov a poskytujú hotové výsledky v krátkom čase.

PCR diagnostika tuberkulózy u detí a dospelých

Moderné diagnostické metódy (pcr, diaskintest, kvantiferon test) sú vysoko účinné, ale v praxi neboli štúdie overené. Tuberkulínová diagnóza bola základom pre identifikáciu infikovaných a chorých ľudí.

Metóda umožnila identifikovať veľa chorých ľudí, znížiť štatistiku chorobnosti, úmrtnosti.

Výskyt mikroskopie mykobaktérií a spúta podľa Zill-Nelson vám umožňuje spoľahlivo diagnostikovať infekciu. Problém spôsobuje presné odobratie spúta priamo z postihnutého priedušku. Na pozadí tuberkulózneho procesu je ovplyvnená významná časť bronchiálneho stromu. Po očkovaní baktériami je možné uskutočniť test citlivosti patogénu na antibiotikum.

Po analýze výsledku diagnostiky zo strany fiškalizátorov bolo jasné, že nedostatok vylučovania Kochových tyčiniek neznamená, že sa v tele nevyskytuje infekcia. Kauzatívny agens je možné stanoviť po druhom, treťom, štvrtom odbere materiálu.

Moderné diagnostické metódy (dst, Quantiferon test) detegujú mykobaktérie s aktívnym priebehom ochorenia. V prítomnosti mykobaktérií vo vnútri lymfatických uzlín, s extrapulmonálnymi formami ochorenia, sú testy najčastejšie negatívne.

Včasná diagnóza je základom prevencie závažných komplikácií a nebezpečných následkov ochorenia.

Moderné metódy

Nahradenie klasickej tuberkulínovej diagnózy je diaskintest (dst). Podľa najnovších predpisov by štúdia mala nahradiť štandardný test Mantoux, ktorý umožnil identifikovať mnoho prípadov morbidity a infekcie medzi obyvateľstvom.

Podstata Diaskintestu, ako aj tuberkulínová diagnóza, zahŕňa subkutánne podávanie proteínov patogénov tuberkulózy. V reakcii na injekciu sa vyvinula reakcia z precitlivenosti so špecifickými zmenami kože: začervenanie, indurácia, tvorba pľuzgierikov.

Pozitívny výsledok Diaskintestu je typický pre pacientov s aktívnym priebehom ochorenia. V prípade infekcie alebo zvýšenej alergizácie bude štúdia negatívna. Negatívny účinok dst môže byť výsledkom silnej imunity, ale keď je človek infikovaný.

V porovnaní s Mantu je Diaskintest všestrannejším a citlivejším spôsobom diagnostikovania tuberkulózy. Absencia detekcie infekcie vyžaduje jeho použitie súčasne s tuberkulínovou diagnózou.

Napriek výsledkom klinických skúšok, vedci tvrdia o všeobecnej univerzálnosti a citlivosti metódy, štúdia sa nemôže považovať za univerzálne diagnostické riešenie.

Test bol vyvinutý akademikmi zo Sechenov Research Institute. Absencia alergií pri použití diaskintestu sa vysvetľuje subkutánnym podávaním druhovo špecifických proteínov tuberkulózy. Po ich zavedení sa určuje kožná reakcia vo forme sčervenania, tuleňov.

Čo je kvantiferon test

Test kvantifikátora sa hodnotí po užití krvi pacienta. Mechanizmom postupu je stanovenie gama-interferónu, ktorý je uvoľňovaný T-lymfocytmi po stretnutí s mykobaktériou tuberkulózou. Testy určujú tuberkulózne proteíny, ktoré obsahujú nielen ľudské a hovädzie baktérie. Test kvantifikátora sa môže tiež použiť na diagnostiku mykobakteriózy spôsobenej inými mykobaktériami, ktoré vytvárajú špecifické zmeny na röntgenovom žiarení. Výsledok testu sa stanoví v niekoľkých skúmavkách, čo zvyšuje diagnostickú citlivosť metódy.

PCR na diagnostiku detskej tuberkulózy

Polymerázová reťazová reakcia je presný, ale nákladný spôsob diagnostiky tuberkulózy. PCR sa vykoná po bronchoskopii.

Po získaní negatívnych výsledkov je racionálne vykonávať polymerázovú reťazovú reakciu. Výsledky sa hodnotia po trojnásobnej kultivácii spúta Mycobacterium tuberculosis. Za najpriaznivejších podmienok identifikácia patogénu indikuje infekciu. Účel chemoprofylaxie sa vyhýba aktívnemu tuberkulóznemu procesu v prítomnosti Kochových tyčiniek.

Po prijatí kmeňa mikroorganizmu je možné nasadenie na antibiotickú citlivosť. Stanovenie antibiotík, ktoré môžu zabiť mikroorganizmy, nám umožňuje vyhodnotiť, ktoré lieky na liečbu infekcie.

PCR u detí sa vykonáva s negatívnymi výsledkami očkovania, ale ak sa objaví obrat tuberkulínového testu, vizualizácia RTG príznakov infekcie, detekcia klinických príznakov súčasnej infekcie.

Polymerázová reťazová reakcia poskytuje vysokú presnosť (asi 99%). Metóda je založená na amplifikácii nukleovej kyseliny. Mykobaktérie, vírusy a iné mikroorganizmy majú jedinečné nukleotidové sekvencie. Ich diagnóza umožňuje identifikovať pôvodcu ochorenia.

Citlivosť PCR u detí je nižšia ako u dospelých. V praxi sa zistili nasledujúce vlastnosti polymerázovej reťazovej reakcie u dieťaťa:

1. Špecifickosť - 80-100%;
2. Citlivosť - 25-80%.

Napriek vysokej presnosti metódy, získanie negatívneho výsledku neznamená absenciu tuberkulózy u detí. Racionálnejšie použitie metódy u pacientov so stavom imunodeficiencie. V diagnostike extrapulmonálnej tuberkulózy.

Interpretačné chyby sú určené porušením zhromažďovania a prípravy materiálu pre štúdiu.

Dôvody negatívneho výsledku PCR v diagnostike tuberkulózy

Šírenie mykobaktérií v tele lymfatickými (cez lymfatické cievy) a hematogénnymi (cez krvný obeh) zabezpečuje kolonizáciu mnohých tkanív, výskyt extrapulmonálnych ohnísk infekcie.

Pri stanovení rôntgenových ložísk deštrukcie (deštrukcie) v pľúcach nie je potrebné PCR. U dospelých, s použitím rádiografie, je možné identifikovať pokročilé formy s vysokým stupňom dôvery.

U detí sa štúdia PCR používa častejšie kvôli latentnej lokalizácii mykobaktérií vo vnútri lymfatických uzlín, čo vedie k negatívnym výsledkom pri použití iných diagnostických metód. Pri bakteriálnej kultúre stačí detegovať približne 10 mikroorganizmov. Treba mať na pamäti, že nie každý je zodpovedný za aktívnu pľúcnu tuberkulózu.

Pre správnu diagnózu PCR, očkovanie baktérií, by sa mali dodržať požiadavky DST:

1. Materiál skladujte v sterilných skúmavkách;
2. Eliminovať vstup iných baktérií;
3. Pri preprave dodržiavajte osobnú hygienu, aby nedošlo k pádu biomateriálu na telo, tvár a dýchacie cesty.

Uchovávaná krv spolu s konzervačnou EDTA. Existujú jedinečné vlastnosti prípravy materiálu pre každú laboratórnu analýzu, s ktorou sú odborníci oboznámení.

Inovatívne diagnostické metódy

Včasná detekcia infekcie umožňuje včasnú chemoprofylaxiu na prevenciu závažného ochorenia.

Vymazanie kliniky v detstve, nedostatočné výsledky testov, negramotná interpretácia hodnotenia vzoriek neumožňuje včasné overenie infekcie. Aby sa predišlo chorobnosti dojčiat, je potrebná starostlivá analýza výsledkov s možnosťou stanovenia diagnózy v ranom štádiu.

Moderná metóda laboratórnej diagnostiky tuberkulózy u detí - detekcia TAB-TM

Reakcia na stanovenie markera T-buniek u detí nazývaných „TAB-TM“ sa vyznačuje vysokou citlivosťou. Podstata metódy spočíva v identifikácii konkrétneho klastra diferenciácie (CD-27) lokalizovaného na povrchu T-lymfocytov. Po izolácii tohto faktora sa cytokíny zafarbia cytometriou.

Metóda bola opísaná v literatúre od roku 2014. Výsledky pozorovaní poukazujú na vysokú citlivosť metódy. Stanovenie TAB-TM je expresná metóda na diagnostikovanie tuberkulózy vyšetrením spútom.

Krvný test na tuberkulózu

V počiatočnom štádiu dochádza k infekcii tuberkulózy bez špecifických klinických symptómov. Laboratórna diagnóza u detí je možná, keď sa Kochova tyč násobí.

Aké bunky sa hodnotia v tuberkulóznom procese v laboratórnom krvnom teste:

1. Červené krvinky sú červené krvinky, ktoré sú zodpovedné za transport kyslíka do tkanív. S ľahkým priebehom pľúcnej tuberkulózy zo strany červeného výhonku krvi nie sú žiadne patologické zmeny. Prítomnosť deštruktívneho zamerania prispieva k krvácaniu s krvnou anémiou. Stav sa vyvíja s tuberkulóznym zápalom črevnej steny. Počet retikulocytov na pozadí patológie sa zvyšuje o viac ako 1%;
2. Leukocyty sa zvyšujú s akoukoľvek infekciou. Leukocytóza je sprevádzaná posunom leukogramu doľava. Zvýšenie počtu segmentovaných neutrofilov možno sledovať v počiatočnom štádiu. Pri ťažkej tuberkulóze s hnisavou fúziou, stavmi imunodeficiencie sa pozorovala leukopénia (pokles počtu krvných leukocytov). Zároveň zvyšuje obsah lymfocytov (nad 20%);
3. Eozinofília môže byť sledovaná do počiatočného štádia. K tomuto stavu dochádza, keď tuberkulózne infiltráty rôznych orgánov. Ťažká tuberkulóza s rozpadom u dospelých vedie k úplnej absencii eozinofilov;
4. Zvýšenie bazofilu.

Laboratórne testy na tuberkulózu nie sú špecifické pre deti ani dospelých. Takéto zmeny sú charakteristické pre mnohé bakteriálne alebo vírusové infekcie.

Hemogramové indikátory poskytujú záujem špecialistom TB na určenie štádia infekcie tuberkulózy.

Pri aktívnej infiltrácii je možné vysledovať leukocytózu v dôsledku zvýšenia počtu neutrofilov. V bunkách sa objavuje patologická drvina, ktorá indikuje otravu krvi.

Centrá rozpadu vedú k poklesu počtu eozinofilov, neutrofilov, mladých foriem, lymfocytov. Keď dôjde k diseminácii, vyskytne sa absolútna monocytóza. Na pozadí resorpcie sa zvyšuje počet lymfocytov a eozinofilov.

Pri konsolidácii centier nie je hemogram charakterizovaný zmenami.

Detské testy na tuberkulózu: tuberkulínová diagnóza

Po dlhú dobu, phisiaisia ​​lekári Mantoux reakcie. Takéto testy na tuberkulózu umožnili zistiť nielen aktívnu infekciu, ale aj infekciu. Podstatou vzorky bola subkutánna injekcia tuberkulínu - látka, ktorá spôsobila alergizáciu tela. Materiál z cesta získaný z Micobacterium Bovis. Po subkutánnej injekcii sa získa papula, ktorá odráža odpoveď organizmu na prenikanie mykobaktérií:

1. Normálna papula - veľkosť od 5 do 16 mm;
2. V neprítomnosti reakcie - oslabenie imunitného systému, absencia mykobaktérií;
3. Veľké papule - prítomnosť bakteriálnych antigénov, kontakt s nosičom tuberkulóznych bacilov.

Metóda sa nepovažuje za spoľahlivú vzhľadom na veľký počet falošne pozitívnych reakcií. Pri pochybných výsledkoch sa vyžaduje potvrdenie PCR. S príchodom diaskintestu (dst) sa situácia zmenila. Kombinované použitie metód umožňuje získať spoľahlivejšie výsledky.

Klasické "fytiologické" metódy diagnostiky tuberkulózy

Lekári pre diagnostiku tuberkulózy u detí a dospelých používajú tieto testy:

• Štúdium anamnézy pacienta (kontakt s pacientom alebo nosičom tubulárneho bacilu). Identifikácia sociálnych rizikových faktorov pomáha naznačiť možnú infekciu;
• Stanovenie citlivosti tuberkulínu (Mantoux test) s PPD tuberkulínom v dávke 5-10 TE. Vyhodnotenie výsledku sa uskutoční v priebehu 48-72 hodín;
• Röntgenové vyšetrenie sa vykonáva u detí a dospelých s podozrením na tuberkulózu, ohyb tuberkulínových testov;
• Bakteriologická kultúra je nezvratným dôkazom infekcie spôsobenej Mycobacterium tuberculosis. Pri správnom odbere spúta, detekcii patogénu v oplachu žalúdka sa môžu testy na tuberkulózu považovať za pozitívne. Kochov prútik sa nachádza v hnisavých abscesoch, lymfatických uzlinách, ascitickom výpotku, pleurálnom výpotku, moči, mozgovomiechovom moku;
• Rýchlosť sedimentácie erytrocytov sa zvyšuje s každou infekciou, vrátane tuberkulózy;
• PCR umožňuje identifikovať špecifický patogén, ale štúdia je drahá;
• Diaskintest určuje pľúcnu tuberkulózu, ale často dáva negatívne výsledky v extrapulmonálnej lokalizácii infekcie.

Moderná diagnostika tuberkulózy s použitím komplexu metód umožňuje stanoviť mykobaktérie v tele s vysokým stupňom spoľahlivosti. Pomocou existujúcich metód sa zistí aktívny proces alebo infekcia. Potrebujeme len čas na kontaktovanie odborníkov!

PCR diagnostika tuberkulózy

Tuberkulóza je špecifická infekcia, jej zameranie môže byť celé roky v ľudských tkanivách a potom sa môže šíriť niekoľko mesiacov. Toto je chronické ochorenie, ktorého optimálne liečebné režimy je ťažké vybrať. Jedným z dôvodov je neskorá diagnóza, keď sa mykobaktérie v ľudskom tele už prispôsobili mnohým liekom.

Aké moderné metódy diagnózy existujú? PCR diagnostika - čo to je? Ako sa robí tento výskum? V akých prípadoch je tuberkulóza diagnostikovaná touto metódou a aká je jej podstata?

Čo je to PCR diagnostika

Je to jedna z najmodernejších metód diagnostiky nielen chorôb, ale aj detekcie biologického materiálu. PCR diagnostika bola vynájdená relatívne nedávno. Asi pred 30 rokmi v roku 1983 americký biochemik Carey Banks Mullis navrhol komplexnú schému obnovy biologického materiálu mikroorganizmov v jednom krátkom segmente. Vďaka jeho objavu získal vedec najvyššie ocenenie - Nobelovu cenu.

Čo je to - PCR diagnostika infekcií? Polymerázová reťazová reakcia (PCR) je diagnóza detekcie vírusových ochorení na základe metód genetického inžinierstva. Je široko používaný v lekárskej mikrobiológii, imunológii a virologii. Metóda je univerzálna a pomáha diagnostikovať malé množstvo materiálu. Infekcia môže byť zistená doslova v prvých hodinách infekcie, dlho predtým, než sa objavia prvé príznaky ochorenia.

Metóda spočíva v získaní z materiálu chorého nie samotného patogénu, ale fragmentov genómu (častíc DNA), jeho biosyntézy s následným určením, do ktorej triedy mikroorganizmov získaný genetický materiál patrí pomocou molekulárno-genetických metód.

Napriek tomu, že ide o komplexný proces, trvá oveľa menej času, než mnohé biologické metódy detekcie infekčných agens. V priebehu niekoľkých hodín je možné pomocou PCR zistiť mikroorganizmus. Na to nie je potrebné izolovať ho od životného prostredia (krv, cerebrospinálna tekutina, sputum) a dlho ho pestovať na umelých živných médiách. Stačí, že v študovanom materiáli je prítomný malý fragment DNA vlákna infekčného činidla.

Základom reakcie je možnosť umelých podmienok (in vitro) vytvoriť syntézu molekúl nukleovej kyseliny infekčného agens.

Čo je potrebné pre PCR?

1. Priméry sú segmenty DNA, z ktorých začína biosyntéza alebo tvorba.
2. Nukleotidy alebo komplexné zlúčeniny, ktoré sú základom molekuly DNA alebo RNA.
3. Polymerázová reťazová reakcia nie je možná bez prítomnosti polymerázy, čo je enzým urýchľujúci PCR.

Fázy diagnostiky PCR

Ako sa vykonáva molekulárna diagnostika pomocou PCR? Postup je jednoduchý a trvá krátky čas, berúc do úvahy zber materiálu.

1. Pred začatím štúdie si vezmú potrebný biologický materiál - to je voda priedušiek, krv, obsah žalúdka, spúta. Typ biologického materiálu závisí od podozrivého patogénu.
2. Denaturácia alebo deštrukcia primárnej štruktúry DNA, ktorá sa skladá z dvoch reťazcov. Podstatou tejto fázy je oddelenie dvoch okruhov pod vplyvom vysokej teploty (maximum je 98 ° C, ktoré trvá maximálne dve minúty).
3. V ďalšom štádiu PCR, nazývanom annealing, sa teplota zníži o niekoľko stupňov, takže primér sa bude viazať na DNA vlákno.
4. Predĺženie, počas ktorého prebieha syntéza požadovaných molekúl priamo.

Výsledkom je, že iba 25 - 30 takýchto cyklov dostáva potrebný počet kópií DNA mikroorganizmu, ktoré sa ľahko rozpoznávajú.

Vyžaduje PCR diagnostiku tuberkulózy?

Nie je možné, aby všetci ľudia s podozrením na tuberkulózu vykonali PCR, pretože metóda vyžaduje drahé vybavenie. Nie všetky verejné kliniky si to môžu dovoliť kúpiť. Okrem toho sa tak stalo, že obvyklé metódy diagnostikovania infekcie sa vo väčšine prípadov opodstatňujú.

Patrí medzi ne:

• Prieskum pacientov, história;
• úplné preskúmanie osoby;
• štúdia s použitím tuberkulínového testu Mantoux;
• rádiografia alebo fluorografia;
• počítačová diagnostika v prípade potreby;
• mikrobiologické výskumné metódy: mikroskopická analýza a bakteriologické vyšetrenie spúta.

PCR pre tuberkulózu sa vykonáva v osobitných prípadoch, keď je ťažké stanoviť diagnózu alebo nie je možné vykonať iné inštrumentálne metódy.

Napriek množstvu diagnostických metód rastie výskyt tuberkulózy. V súčasnosti nie je len jej rast, ale aj ďalšie funkcie:

• choroba sa často vyskytuje v ťažkej forme;
• počet smrteľných prípadov sa zvyšuje;
• sú stále odolnejšie voči modernej chemoterapii, sú diagnostikované formy ochorenia.

Neochota samotných ľudí každoročne podstúpiť rutinné lekárske vyšetrenia, odmietnutie očkovania vedie k šíreniu tuberkulózy. V takýchto podmienkach potrebujeme rýchle, informatívne a účinné výskumné metódy, ktoré by mali byť prístupné deťom a dospelým. Všetky vyššie uvedené diagnostické metódy sú oveľa horšie ako PCR.

Výhody diagnostiky tuberkulózy pomocou PCR

Tento výskum, aj keď nový, sa osvedčil, najmä v kontroverzných prípadoch, kde nie je možné stanoviť diagnózu z viacerých dôvodov.

Vďaka PCR je oveľa ľahšie odhaliť pôvodcu tuberkulózy v testovanom materiáli.

Výhody PCR diagnostiky sú nasledujúce.

1. Toto je rýchla analýza. Malý fragment molekuly DNA sa môže použiť na diagnostiku v priebehu niekoľkých hodín (asi päť), čo sa úspešne používa v núdzových situáciách, keď napríklad pred operáciou je potrebné určiť, či je osoba chorá na tuberkulózu.
2. PCR analýza je povolená v prípade, keď sú iné metódy nedostupné alebo zakázané (na detekciu pľúcnej tuberkulózy, niekedy musíte mať niekoľko rádiologických snímok, čo bude veľká dávka ožarovania).
3. Pomocou PCR sa vyšetruje prítomnosť akéhokoľvek biologického prostredia na prítomnosť pôvodcu. Napríklad môžete vykonať štúdiu mozgovomiechového moku, ak existuje podozrenie na tuberkulóznu meningitídu.
4. Povolená PCR diagnostika infekčných ochorení u detí, pretože metóda je bezpečná.
5. Umožňuje identifikovať patogén v ktoromkoľvek štádiu ochorenia.
6. Vysoká citlivosť PCR umožňuje detekciu Mycobacterium tuberculosis, aj keď je v biologickom materiále len niekoľko mikroorganizmov.
7. Je dobré vykonať diagnózu recidívy ochorenia.

Po tom všetkom čítaná PCR sa zdá byť takmer dokonalou diagnostickou metódou, ktorá by mala spôsobiť podozrenie z tuberkulózy. Existujú však aj nevýhody, ktoré treba brať do úvahy.

Nevýhody PCR v diagnostike tuberkulózy

V našej dobe sú takéto diagnostiky zriedkavejšie ako pravidelnosť. A na to je dôvod.

1. Ide o nákladnú metódu výskumu. Na mnohých klinikách chýba zariadenie pre PCR kvôli jeho vysokým nákladom, ale analýza môže byť stále vykonaná v platených laboratóriách.
2. Ihneď po ošetrení sa v ľudskom tele môžu stále nachádzať mŕtve mykobaktérie alebo žijúce v malých množstvách (výsledok bude pozitívny počas diagnostiky PCR), takže metóda bude v tomto čase nespoľahlivá, nemá zmysel ju vykonávať.
3. Výsledkom mutácií mykobaktérií je neúčinná PCR - nie je možné syntetizovať normálnu sekvenciu DNA reťazca.
4. Je potrebné vybrať správne prostredie pre štúdiu, krv sa odoberá len vtedy, ak je podozrenie, že je infikovaná (sepsa), nie je potrebné brať spúta, ak existuje otázka tuberkulózy orgánov nervového systému. V tomto prípade PCR nebude schopná detegovať patogén a diagnóza bude neinformatívna.

Indikácie na detekciu tuberkulózy pomocou PCR analýzy

PCR diagnostika tuberkulózy sa vykonáva najčastejšie v kontroverzných prípadoch. Kedy lekári odkazujú na túto štúdiu?

1. Ak je ťažké stanoviť diagnózu pomocou obvyklých metód, ale bol tu kontakt s pacientom s tuberkulózou.
2. V prípade, že nie je možné osobu na kliniku podrobiť rutinným rutinným testom na tuberkulózu, je ľahšie ju vyšetriť pomocou PCR, pretože spúta na test sa môže podať v nádobe a diagnóza sa potvrdí v priebehu niekoľkých hodín.
3. Ak má osoba núdzovú operáciu a je naliehavé zistiť, či je chorý na tuberkulózu.
4. Ak je to potrebné, tehotná žena je tiež lepšie skúmať na tuberkulózu pomocou PCR, pretože metóda je bezpečná.
5. Každý, kto nebol diagnostikovaný s tuberkulózou, bol na základe platenia potvrdený bakteriologickými metódami a fluoroskopiou. Toto sa stane, keď je lézia v pľúcach v priamom obraze nepostrehnuteľná a osoba počas dodania spúta na štúdiu nemohla nasledovať odporúčania pre správny zber materiálu. V tomto prípade sa osoba obáva všetkých príznakov charakteristických pre pľúcnu tuberkulózu.
6. Keď existujú pochybnosti o výsledkoch testu Mantoux.
7. U detí je vhodnejšie urobiť PCR diagnostiku tuberkulózy. Tento postup je bezpečný, nevytvára ďalšie ožarovanie a je účinný pri odhaľovaní ťažko diagnostikovateľných foriem ochorenia.

Včasná diagnostika tuberkulózy je kľúčom k správne predpísanej liečbe a zníženiu šírenia choroby. Známe metódy detekcie chorôb nie sú vždy účinné. Preto je dnes PCR jedným z najspoľahlivejších a najbezpečnejších spôsobov detekcie infekcie v ranom štádiu jej vývoja.

PCR analýza (diagnostika) tuberkulózy

Tuberkulóza alebo spotreba - jedna z najpopulárnejších infekčných chorôb 21. storočia. Jeho patogény sú špeciálne mikrobaktérie - tyčinky Koch.

Choroba sa šíri nielen do pľúc, ale aj do mozgu, trávenia, kĺbov alebo chrbtice, močového systému a kože.

Podľa WHO trpí každoročne 10 miliónov ľudí tuberkulózou, z ktorých 3 milióny sú smrteľné.

Situácia je obzvlášť smutná na území krajín SNŠ, tu sa pravidelne vyskytujú tuberkulózne epidémie. Rusko, Kazachstan, Ukrajina sú vedené smutným hodnotením o šírení tejto infekcie.

Infekcia je ľahko prenášaná vzduchom rozptýlenými kvapôčkami alebo cez tráviaci systém, ovplyvňuje životne dôležité orgány a je tiež schopná rýchlo sa prispôsobiť polymérnym liečivám a chemoterapii.

Jedným z hlavných faktorov úspešnej liečby tuberkulózy je včasné odhalenie infekcie.

Diagnostické metódy

Ľudstvo vyvinulo mnoho metód na rozpoznanie nebezpečnej choroby. Diagnóza tuberkulózy je rozdelená na inštrumentálne a laboratórne.

V prvom prípade, krvný test na tuberkulózu, rovnako ako spúta, moč.

Druhou skupinou je štúdia využívajúca röntgenové a endoskopické vyšetrenie. Inštrumentálne metódy na diagnostikovanie tuberkulózy sú zas radiačné a chirurgické.

Druhy radiačných metód nájdenia ochorenia

• Fluorografia je metóda diagnostiky choroby, ktorá je známa každému obyvateľstvu SNŠ. Pomocou röntgenových lúčov sa vyšetrujú pľúcne a hilar lymfatické uzliny.
• Röntgen hrudníka - podobný fluorografii, ale lepší spôsob detekcie infekcie. Obraz je získaný podrobnejšie a v dvoch projekciách, ale tento postup je asi šesťkrát drahší. Zvyčajne sa používa po vzniku vážneho podozrenia na ochorenie.
• Počítačová tomografia sa vykonáva ako dodatočná diagnóza, ktorá sa používa aj po dobrom dôvode na prítomnosť infekcie.

Chirurgické metódy diagnózy zahŕňajú bronchiálnu endoskopiu, ako aj mediastinoskopiu a torakoskopiu.

Prvou metódou je štúdium bronchiálneho stromu pľúc pomocou „sondy“ v tomto orgáne. Zostávajúce dve metódy umožňujú študovať pleurálnu časť pľúc punkciou hrudníka.

Všetky tri metódy sú závažným chirurgickým zákrokom a najčastejšie sa používajú v procese progresie ochorenia.

Laboratórne testy zahŕňajú:

• Analýza spúta pre tuberkulózny bacilus.
• Mikroskopické vyšetrenie.
• PCR diagnostika tuberkulózy

Čo je to PCR diagnostika?

Jedna z najmodernejších metód laboratórnej diagnostiky infekčných špecialistov nazýva polymerázová reťazová reakcia.

Táto metóda bola vyvinutá slávnym americkým vedcom Carrie Mullis v roku 1983, za ktorú získal Nobelovu cenu.

PCR analýza je izolácia častíc DNA zo spúta, krvi, mozgovomiechového moku, výkalov atď. pre ich následnú biosyntézu.

Pomocou komplexnej molekulárno-genetickej štúdie sa stanoví charakter mikróbov v tele pacienta.

Tento druh analýzy tuberkulózy sa vykonáva v niekoľkých štádiách:

• Najprv sa odoberú biologické vzorky. Materiály sú umiestnené v špeciálnych nádobách a odoslané do laboratória.
• Vo výskumnom centre sú analýzy vyhrievané na 97 stupňov. To umožňuje zničiť štruktúru genómu DNA mikroorganizmov, ktorá sa skladá z niekoľkých reťazcov.
• Teplota je špecificky znížená tak, že priméry (účastníci DNA, z ktorých začína proces biosyntézy) sa môžu pripojiť k akémukoľvek reťazcu deoxyribonukleovej kyseliny.
• Potom sa uskutoční biosyntéza molekúl potrebných na detekciu.

Po 25–30 opakovaných cykloch v laboratórnom výskume majú lekári možnosť rozpoznať, či sú v tele pacienta prítomné infekčné mikroorganizmy alebo nie.

Výhody a nevýhody

PCR pre tuberkulózu je najmodernejšia diagnostická technika. Spôsob umožňuje detekciu infekcie v akomkoľvek štádiu s vysokou spoľahlivosťou. výhody:

• Rýchlosť - štúdia trvá maximálne päť hodín. Výsledky testu na mikróby tuberkulózy možno nájsť do 24 hodín.
• Bezpečnosť - PCR metóda nemá vekové kontraindikácie.
• Včasnosť - táto technika vám umožňuje zistiť tuberkulózu v tých štádiách, keď choroba nemá žiadne príznaky.
• Vysoký stupeň presnosti - ak v analýzach existuje len niekoľko mikroorganizmov, zistí sa pomocou polymerázovej reťazovej reakcie. Táto technika tiež umožňuje ľahko identifikovať pôvodcu tuberkulózy.
• Všestrannosť - diagnostika sa používa nielen na zisťovanie spotreby, ale aj na iné choroby, ako sú chlamýdie, kvapavka atď.

Napriek mnohým výhodám je použitie tejto techniky v domácej lekárskej praxi skôr výnimkou ako pravidlom. Existuje niekoľko dôvodov.

Nevýhodami tejto metódy sú:

• Vysoké náklady na prieskum.
• Táto metóda nie je vhodná pre tých, ktorí podstúpili terapiu, pretože prítomnosť mŕtvych baktérií Koch môže viesť k falošne pozitívnemu výsledku.
• V prípade mutácie infekčných mikroorganizmov ich genóm nemožno rozpoznať falošným záverom.
• Je dôležité zvoliť správne prostredie na detekciu. Napríklad výsledok krvného testu na PCR na tuberkulózu (vstup riedenia) bude negatívny, ak je infikovaný nervový systém.
• Nie je vždy možné aplikovať túto metódu na pacientov s diagnózou pľúcnych lézií.

Takáto analýza tuberkulózy si okrem toho vyžaduje moderné vybavenie, ktoré nemá 90 percent nemocníc. V CIS môže takúto analýzu vykonávať sieť kliník Invitro.

Podmienky analýzy

Odporúčania pre pacientov podrobujúcich sa takémuto testu na tuberkulózu sa líšia v závislosti od typu analýzy, ktorú absolvujú.

Pri odoberaní krvi na PCR je potrebné zdržať sa fajčenia hodinu pred zákrokom, aby dvaja prestali užívať alkoholické nápoje a tučné jedlá.

Odporúča sa tiež vyhnúť sa fyzickej námahe, je tiež nemožné odobrať krv na tuberkulózu nalačno.

Keď vezmete tampón z úst a nosovej dutiny, nemôžete jesť 2-4 hodiny pred zákrokom, inak to nebude informatívne. Tiež nepite alkohol.

Pre presné odčítanie údajov je zakázané fajčiť skôr ako hodinu pred zákrokom. V predvečer sa vyhnite čisteniu zubov a sprejov a ústnych sprejov.

Ak máte podozrenie na tuberkulózu urogenitálneho systému, pacient 2-3 dni pred pôrodom by mal vylúčiť pohlavie, 2-3 hodiny pred zákrokom, nechodiť na toaletu „malým spôsobom“. Genitálne orgány by sa mali umyť čistou vodou bez špeciálnych prostriedkov.

Ženám sa odporúča, aby nepoužívali vaginálne tablety, sviečky, loptičky a tiež sa zdržali testovania v kritických dňoch.

5 dní pred pôrodom je výsledok nevyhnutný na ukončenie zákroku kolposkopie, ako aj transvaginálneho ultrazvuku,

Kedy sa používa diagnostika PCR?

Nie každá klinika má takú komplexnú diagnózu, ale lekári sa čoraz viac uchyľujú k takýmto metódam výskumu. Zvyčajne sa tento druh analýzy vykonáva v osobitných situáciách.

• V prípade pochybných výsledkov manty sa môže použiť krvný test na tuberkulózu.
• V prípadoch, keď bol pacient v kontakte s infikovanou osobou, ale ošetrujúci lekár nemôže presne určiť diagnózu.
• V prípade naliehavej operácie, keď je potrebné zistiť v krátkom čase, či má pacient túto infekciu.
• Keď je pacientka tehotná, keď iné výskumné metódy nie sú dostatočne bezpečné pre novorodenca.

Treba poznamenať, že táto diagnóza sa odporúča pre deti kvôli jej bezpečnosti.

Ak má študent kontraindikácie proti tuberkulínovému testu, môže namiesto krvného testu vykonať PCR vyšetrenie na tuberkulózu.

Čo je to PCR analýza tuberkulózy

Inovatívna metóda detekcie mikroorganizmov, ktorú objavil vedec Cary Mullis na konci minulého storočia - PCR analýza. Za svoje spisy dostal Nobelovu cenu. Tento proces sa nazýva polymerázová reťazová reakcia. Spočíva v obnovení typu mikroorganizmu v poskytnutom biomateriáli použitím krátkych fragmentov DNA. To vám umožňuje včas odhaliť infekciu a okamžite začať liečbu bez toho, aby to viedlo k vážnym symptómom a komplikáciám.

Čo je to analýza

Diagnostika pomocou PCR je získať segmenty patogénnej DNA z biologického materiálu a zarovnať ich do správneho reťazca. To umožňuje identifikáciu mikroorganizmu, ku ktorému bunky patria.

Postup sa vykonáva v troch fázach: t

1. Zber biologického materiálu.
2. Identifikácia a porovnanie DNA.
3. Rozpoznanie infekcie.

Táto štúdia vyžaduje špeciálne lekárske vybavenie - zosilňovač. Je vybavená kamerou, kde študovaný materiál interaguje s vysokoteplotnými a chemickými enzýmami. Na výstupe má laboratórny technik dlhý reťazec DNA pôvodcu, ak je v ľudskom tele jeden.

Ako sa pripraviť na diagnózu

PCR analýza je komplexný proces genetického inžinierstva, ktorý vyžaduje presnosť a serióznosť od laboratórnych technikov aj pacientov. Veľkú úlohu v správnosti výsledkov analýzy zohráva príprava na postup, teda správny zber materiálu.

Hlavnými zdrojmi informácií o tejto chorobe sú:

Môžu sa použiť aj iné možnosti, ak je to potrebné, kvapaliny sa odoberajú na analýzu z rôznych orgánov.

Pre pacienta existujú určité pravidlá, ktoré sa musia dodržiavať pred zákrokom. Ak je krvný test, je zakázané 8 hodín pred odberom:

• jesť potraviny;
• fajčiť;
• alkoholické nápoje;
• vziať lieky dovnútra.

Vo večerných hodinách, pred zberom spúta, droga je opitý, aby ju riediť a uľahčiť vykašliavanie. Ráno zbierajte materiál po dôkladnej hygiene ústnej dutiny.

Moč sa zhromažďuje v sterilnej nádobe ráno nalačno, po umytí pred užitím akéhokoľvek lieku.

Ak človek berie antibiotiká, potom analýza polymerázovej reťazovej reakcie by sa mala odložiť, inak výsledok PCR nie je spoľahlivý. Sputum alebo krv by sa mali darovať dva týždne po ukončení liečby.

Ako prebieha proces identifikácie baktérií

Stručne povedané, proces je izolovať časť DNA. Použitie moderných metód genetického inžinierstva nám umožňuje určiť typ mikroorganizmu. Navyše materiál na analýzu potrebuje malé množstvo.

Technicky je to veľmi komplikovaný postup, ale trvá menej času ako klasické bakteriologické štúdie. Patogény sa nemusia izolovať od biomateriálu, nie je potrebné ich niekoľko týždňov pestovať. V deň podania môže pacient už poznať výsledok svojej analýzy.

Celý proces PCR prebieha v etapách:

1. Práca prebieha s primárnou formou DNA, ktorá sa pri vysokej teplote, ktorá je blízka 100 stupňom, delí na dva reťazce.
2. Teplota klesá, vlákna sú pripojené k fragmentom nukleovej kyseliny - priméru.
3. Predĺženie nastáva - syntéza molekulárnej štruktúry.

Celá relácia sa skladá z asi tridsiatich takýchto postupov, opakujúc cyklus ako reťazová reakcia. To je nevyhnutné na vytvorenie počtu buniek, v ktorých sa výsledné baktérie stanú rozpoznateľné.

Záver štúdie

Popis výsledku PCR (polymerázová reťazová reakcia) poskytuje TB lekárovi, je jednoduchý alebo nasadený. V prvom prípade bude opis obsahovať iba informáciu o prítomnosti alebo neprítomnosti Kochových tyčiniek. Ak je dekódovanie podrobné, z neho môžete zistiť rozsah ochorenia, jeho zameranie. Podľa týchto kritérií je možné v každom prípade určiť najvhodnejšiu liečbu tuberkulózy.

Polymerázová analýza reťazovej reakcie nerozlišuje medzi živými a mŕtvými patogénmi a hovorí len o ich prítomnosti. Preto má zmysel absolvovať druhý test na tuberkulózu len 3 - 4 týždne po prechode liečby predpísanej lekárom.

Ak je výsledok pozitívny, na záver je uvedený nápis „Mycobacterium tuberculosis“. Ak je negatívny výsledok, vedľa biologického názvu baktérií je značka "nezistená". Analýzy môžu byť falošne pozitívne. Stáva sa to zriedkavo - v prípade porušenia techniky vykonávania štúdií PCR alebo v prítomnosti neživotaschopných mikroorganizmov. Konečný záver o chorobe môže urobiť len lekár TBC.

Výhody metódy

PCR diagnostika tuberkulózy získala popularitu z mnohých dôvodov. Má mnoho výhod, vrátane:

1. Presnosť výskumu. Pri analýze technológie je možné identifikovať baktérie, aj keď sú prítomné v malých množstvách.
2. Rýchly výsledok. Celý proces od zberu materiálu až po hotový záver trvá približne 5 hodín. V porovnaní s výsevom musí čakať až niekoľko týždňov.
3. Úplná bezpečnosť pre osobu, na rozdiel od fluorografie s jej žiarením.
4. Používa sa akýkoľvek kvapalný biomateriál. Pre implementáciu PCR pri pľúcnej tuberkulóze poskytuje spútum najpresnejšie informácie, pri tuberkulóznej meningitíde sa odoberá vzorka z miechy. Krvný test pomáha identifikovať lokálne ložiská infekcie.
5. Testuje sa citlivosť baktérií na antibiotiká. To vám umožňuje predpísať správnu liečbu.
6. Včasná diagnostika. Môžete sa dozvedieť o prítomnosti ochorenia pred nástupom jeho príznakov.

Okrem pozitívnych aspektov existujú aj nevýhody. Hlavnou je cena. Analýza PCR nie je lacná, čo je spojené s použitím drahého zariadenia. Ďalšou nevýhodou je potreba počkať na čas na opätovné testovanie po liečbe tuberkulózy. Niekedy je výsledok testu falošne pozitívny. Toto sa deje v dôsledku bakteriálnej mutácie.

Keď je potrebná PCR

PCR na pľúcnu tuberkulózu nemá žiadne kontraindikácie a je absolútne bezpečná. Preto existujú určité situácie a choroby, keď je to jediná možnosť výskumu.

Patrí medzi ne:

• tehotenstva;
• kontakt s tuberkulóznym pacientom;
• ťažkosti pri určovaní diagnózy pľúcneho ochorenia;
• vyšetrenie pred operáciou;
• alergická reakcia;
• HIV infekcia;
• veku.

Metódu PCR môžete použiť v smere, ktorý je vydávaný vo fytiziológii, ako aj pediater, lekár alebo pulmonológ.

Čo môže nahradiť PCR diagnostiku tuberkulózy

Iné typy prieskumov sa nestali zastaranými, ale naďalej sa používajú. Používajú sa v prípadoch, keď nie je možné vykonať PCR na tuberkulózu. Okrem toho, moderná metóda nie je ideálna, niekedy sa jej ukazovatele spochybňujú a vyžadujú opätovné overenie.

Nasledujúce metódy pomáhajú určiť prítomnosť tuberkulózy u osoby:

• tuberkulínová diagnóza (Mantoux);
• röntgen hrudníka;
• testovanie biologického materiálu pre flóru;
• röntgen pľúc.

Tieto štúdie sú bezplatné a dostupné všetkým. Ale majú svoje nevýhody:

• Test na tuberkulózu spôsobuje alergie. Kontraindikované pri kožných ochoreniach.
• Röntgenové štúdie sú doplnené ožarovaním, ktoré nie je možné použiť u detí, ľudí s nedostatočnou imunitou a tehotných žien.
• Bakteriologické analýzy trvajú oveľa dlhšie, výsledok je možné čakať až mesiac.

Alternatívy nie sú zárukou 100% správneho záveru. Najčastejšie sa používajú na preventívne účely. Diagnostika tuberkulózy pomocou PCR poskytuje najspoľahlivejšie informácie. Ak je to možné, je lepšie ho používať.

Zvláštnosti tuberkulózy u detí a potreba PCR

Dieťa by malo byť obzvlášť chránené pred ochorením - tuberkulózna infekcia môže spôsobiť vážne poškodenie organizmu s ešte nie celkom vytvorenou imunitou.

Po vstupe do Kochovho prútika do detského organizmu prechádza vývoj ochorenia nasledujúcimi štádiami:

• Latentný. To trvá až jeden rok, bez toho, aby sa akékoľvek príznaky.
• Intoxikácie. Ovplyvňuje celkové zdravie. Objavuje sa slabosť, apatia, nedostatok apetítu, ospalosť a znížený výkon. Trvale mierne zvýšená teplota.
• Primárna forma ochorenia. Tuberkulóza je lokalizovaná a tvorí ohnisko ochorenia. Dieťa má kašeľ, dýchavičnosť, bolesti hlavy, opuchnuté lymfatické uzliny.
• Tuberkulózna bronchoadenitída. Symptómy sú bolesť v lopatkách, kašeľ s rôznou intenzitou zvuku, sipot.

Zvyčajne sa tuberkulín podáva injekčne na identifikáciu infekcie pod kožou dieťaťa. Ak je tento typ vyšetrenia kontraindikovaný, potom PCR na tuberkulózu je nevyhnutnou voľbou pre diagnostiku. Deti zvyčajne vykonávajú krvný test, ale v prípade potreby sa odoberá spúta. Pri najmenšom podozrení na prítomnosť tuberkulózy sa vykonávajú ďalšie štúdie, aby sa zabezpečil pozitívny výsledok a okamžite sa začalo s liečbou v počiatočnom štádiu, čím sa zabráni vzniku ochorenia.

Moderné výskumné metódy sú vždy rýchlejšie a spoľahlivejšie. Je škoda, že kvôli drahému vybaveniu takýchto testov existuje možnosť nie vo všetkých zdravotníckych zariadeniach a lokalitách. Aký spôsob vykonania vyšetrenia si zvyčajne vyberá lekár, ale pacient má právo si vybrať. Ak ste museli urobiť test PCR, povedzte nám to v komentároch. Ak bol článok pre vás užitočný, zdieľajte ho v sociálnych sieťach - možno to pomôže vašim priateľom.